一、引言
紫外可見分光光度計(jì)，作為一種重要的分析儀器，被廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域。它通過測(cè)量物質(zhì)對(duì)紫外可見光的吸收特性，實(shí)現(xiàn)對(duì)物質(zhì)的定性和定量分析。本文將詳細(xì)介紹紫外可見分光光度計(jì)的設(shè)計(jì)、原理與使用。
二、紫外可見分光光度計(jì)的設(shè)計(jì)
紫外可見分光光度計(jì)主要由光源、單色器、樣品池、檢測(cè)器和信號(hào)顯示系統(tǒng)五大部分組成。
1.光源：是提供符合要求的入射光的裝置，有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用于可見光區(qū)，一般為鎢燈和鹵鎢燈；氣體放電光源用于紫外光區(qū)，一般為氫燈和氘燈。
2.單色器：功能是將光源產(chǎn)生的復(fù)合光分解為單色光和分出所需的單色光束，它是分光光度計(jì)的心臟部分。
3.樣品池：用于容納樣品，使光能夠充分與樣品接觸。
4.檢測(cè)器：用于測(cè)量透射光的強(qiáng)度，將其轉(zhuǎn)換成電信號(hào)輸出。
5.信號(hào)顯示系統(tǒng)：將檢測(cè)器輸出的電信號(hào)轉(zhuǎn)換成可讀的吸光度或透射率值，并顯示在屏幕上。
三、紫外可見分光光度計(jì)的原理
紫外可見分光光度計(jì)的原理主要基于比爾-朗伯定律和蘭伯特-比爾定律。比爾-朗伯定律是指溶液中溶質(zhì)濃度與溶液對(duì)光的吸收成正比；蘭伯特-比爾定律是指光在透過介質(zhì)時(shí)強(qiáng)度與介質(zhì)厚度成指數(shù)關(guān)系?；谶@兩個(gè)定律，紫外可見分光光度計(jì)利用光源發(fā)出一定波長的光，樣品吸收部分光線，其余光線通過樣品，最后通過檢測(cè)器測(cè)量透射光的強(qiáng)度，從而得到樣品對(duì)特定波長光的吸收情況。
四、紫外可見分光光度計(jì)的使用
1.開機(jī)：打開樣品室蓋，檢查樣品室中是否放置遮光物，若有取出。打開電源開關(guān)，儀器進(jìn)入預(yù)熱狀態(tài)，預(yù)熱20分鐘。
2.選擇光源：電源開關(guān)打開后，鎢燈即亮；若需要在紫外光區(qū)工作，則需將光源切換至氘燈；若需要在紫外光區(qū)(290nm～360nm)工作，則要同時(shí)點(diǎn)亮氘燈和鎢燈。
3.選擇波長：調(diào)節(jié)波長旋鈕或輸入實(shí)驗(yàn)所需的波長，選擇須用的單色光波長。
4.校準(zhǔn)：目前型號(hào)較新的分光光度計(jì)具有開機(jī)自動(dòng)校準(zhǔn)功能，無自動(dòng)校準(zhǔn)功能的設(shè)備使用前需參照使用說明書手動(dòng)校準(zhǔn)。
5.測(cè)量：如試驗(yàn)方法中無特別規(guī)定，通常使用裝有蒸餾水的吸收池調(diào)零后放入樣品和參比樣進(jìn)行測(cè)試，并記錄測(cè)試結(jié)果。
6.數(shù)據(jù)處理：定量測(cè)試時(shí)通常需要先測(cè)定若干個(gè)已知濃度的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)樣品，根據(jù)其吸光值與濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。目前新型號(hào)的紫外分光光度計(jì)本身都有制作和計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的功能，具體操作方式可參照設(shè)備使用說明。不具備標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制功能的設(shè)備，可利用Excel軟件或坐標(biāo)紙輔助繪制。
7.關(guān)機(jī)：測(cè)量完畢，取出吸收池，清洗并晾干后入盒保存。關(guān)閉電源，拔下電源插頭，在樣品室內(nèi)放入干燥劑，蓋上樣品室蓋，罩上防塵罩。
五、總結(jié)
紫外可見分光光度計(jì)以其靈敏度高、分辨率高、操作簡便等特點(diǎn)，在化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。通過了解其設(shè)計(jì)、原理與使用，我們可以更好地掌握這一分析儀器，為科學(xué)研究提供有力支持。
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